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一株产淀粉酶嗜热菌的酶学性质研究
发布日期:2024-08-04 22:11:38

  3结果分析

  3.1淀粉酶活力的测定

  3.1.1 麦芽糖标准曲线的绘制

  根据实验原理,利用不同浓度的麦芽糖与3,5-二硝基水杨酸的显色反应测得在波长为520nm的条件下分光光度计下的吸光度值,并以吸光度值为纵坐标,麦芽糖含量为横坐标作图1,即为麦芽糖标准曲线图。

  图1 麦芽糖标准曲线图

  3.1.2 淀粉酶活力

  表2 酶活力测定表

编号

0

1

2

3

吸光度值

0

0.512

0.498

0.507

麦芽糖含量(mg)

0

1.13

1.11

1.12

稀释倍数

2

2

2

2

酶活力(MMU)

0

13.56

13.32

13.44

平均酶活力

13.44

  3.2 酶学性质研究结果分析

  3.2.1 温度对酶活力的影响

  在波长为520 nm的条件下用分光光度计测定不同温度下的吸光度值,根据公式计算淀粉酶活力,并根据公式计算各温度下淀粉酶活力并以最高酶活力为一绘制图,由图2可知淀粉酶活力的适用温度范围为40℃-50℃,在温度为45℃的酶活力最强,则淀粉酶最适温度是45℃。

  图2 温度对酶活力的影响

  3.2.2 pH值对酶活力的影响

  在波长为520 nm的条件下用分光光度计测定不同pH值下的吸光度值,并根据公式计算各pH值下的淀粉酶活力并以最高酶活力为一绘制图3,由图3可知淀粉酶活力的pH值范围为5-8,在pH值为6.5时酶活力最强,则淀粉酶最适pH值是6.5。

  图3 pH对酶活力的影响

  3.2.3 不同金属离子对酶活力的影响

  本次实验中将淀粉酶在2mmol/L同浓度Zn2+、Mg2+、K+、Fe2+、Cu2+的1%淀粉溶液中反应,然后在波长为520 nm的条件下用分光光度计测定其吸光度值,并根据公式计算各不同金属离子淀粉缓冲液下的酶活性并以对照酶活性为一作图4,由图4可以看出在同浓度下的金属离子对菌株的影响,镁离子、钾离子均对淀粉酶有促进作用,而钾离子的促进作用最大,其中锌离子、铜离子、铁离子均对淀粉酶抑制作用,而锌离子的抑制作用最明显。

  图4 金属离子浓度对酶活力的影响

  3.2.4 不同浓度的茶碱对淀粉酶的影响

  在本次实验中将淀粉酶在不同浓度茶碱的1%淀粉溶液中反应,然后在波长为520 nm的条件下用分光光度计测定其吸光度值,并根据公式计算不同茶碱浓度的淀粉缓冲液下的酶活性并以对照酶活性为一作图5,由图5可以看出茶碱对淀粉酶有抑制作用,并随着浓度的增加而变强。

  图5 茶碱对酶活力的影响

  4 结论

  本次实验中对产淀粉酶嗜热菌的淀粉酶学性质进行一系列的研究,产淀粉酶嗜热菌的淀粉酶活性会受到温度、pH值、金属离子、茶碱等许多因素的影响。通过实验数据表明,温度和pH值对淀粉酶活性的影响非常明显,最适温度和最适pH值的测定对酶的应用有重要的意义。因此综合上述的因素对产淀粉酶嗜热菌的酶学性质进行研究,来确定产淀粉酶嗜热菌的淀粉酶活性的最佳条件,从而确定淀粉酶的最适温度和最适pH值。通过对已知产淀粉酶嗜热菌的活化得到一株产淀粉酶嗜热菌,并通过离心法获得粗制淀粉酶液。对淀粉酶活性的影响条件进行检测通过实验得出:当温度为45℃时淀粉酶的活性最强,温度在40-50℃时淀粉酶依然保持较高的活性;当温度为45℃时淀粉酶的最适pH为6.5,pH在5-8的范围内淀粉酶依然可以正常工作;在淀粉酶反应体系中加入浓度2mmol/L的镁离子或钾离子时可以提高产酶活力。镁离子、钾离子均对淀粉酶有促进作用,而钾离子的促进作用最大,其中锌离子、铜离子、铁离子均对淀粉酶抑制作用,而锌离子的抑制作用最明显。茶碱对淀粉酶有明显的抑制作用,并随着浓度的增加而变强。通过对实验室保藏的一株产淀粉酶嗜热菌的淀粉酶的一系列实验,得知该酶的反应条件温和适合工业生产。不仅对我们的淀粉酶库有了进一步扩充,而且使淀粉酶工业生产多了一种选择。

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