2.3.3 杂环胺的前处理方法的回收率和精密度
表3 空白样品中10种杂环胺化合物的加标回收率和精密度
Tab. 3 Recovery and precision of 10 HAAs spiked in blank samples
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化合物 Compound |
加标量 Added /(ng /mL) |
回收率（Recovery/%） |
精密度 （RSD /%） |
|||
|
方法一 |
方法二 |
方法一 |
方法二 |
方法一 |
方法二 |
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|
IQ |
10 20 30 |
10 20 50 |
53.6 58.7 62.5 |
59.8 67.6 70.8 |
4.53 3.56 6.75 |
3.65 4.27 5.32 |
|
MeIQx |
10 20 50 |
10 20 50 |
46.7 66.9 71.2 |
66.7 59.6 72.6 |
5.23 3.36 4.39 |
3.16 5.32 4.75 |
|
PhIP |
10 20 50 |
10 20 50 |
78.3 82.6 89.6 |
79.5 75.6 85.1 |
6.31 5.36 5.24 |
4.23 5.26 5.18 |
|
4,8-DiMeIQx、 |
10 20 50 |
10 20 50 |
63.1 77.2 80.3 |
75.3 79.3 86.2 |
4.65 2.89 5.32 |
4.23 3.23 5.19 |
|
Harman |
10 20 50 |
10 20 50 |
46.5 58.3 63.1 |
55.2 59.1 70.1 |
6.31 2.34 3.15 |
5.74 6.23 4.15 |
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Norharman |
10 20 50 |
10 20 50 |
63.1 65.1 77.1 |
76.1 85.3 90.4 |
3.21 4.32 2.95 |
4.23 5.78 2.36 |
|
AαC |
10 20 50 |
10 20 50 |
75.2 86.3 96.3 |
79.2 80.4 90.2 |
3.56 5.31 3.12 |
5.32 4.12 1.78 |
|
MeAαC |
10 20 50 |
10 20 50 |
46.3 75.2 79.4 |
68.1 75.0 80.4 |
2.38 1.32 4.12 |
1.37 3.89 5.65 |
|
Trp-p-1 |
10 20 50 |
10 20 50 |
51.2 55.4 64.1 |
68.1 78.2 85.1 |
4.15 5.23 7.15 |
3.57 5.26 3.69 |
|
Trp-p-2 |
10 20 50 |
10 20 50 |
58.4 65.7 77.1 |
68.1 67.7 80.5 |
1.56 1.89 5.64 |
4.65 5.16 7.64 |
回收率和精密度是检验试验方法是否简便优化的一种评定方法，通过对比回收率和精密度数值的高低可以选择最好的前处理方法。从表3中可以看出方法一的回收率在46.5~96.3%之间，方法二的回收率在59.6~90.4%，方法一的精密度在1.32~7.15%之间，方法二的精密度在1.37~7.64%之间。对比两种方法可以看出两种方法中方法二比起方法一略微有点优势，然而差距不显著。并且对于高效液相色谱串联质谱来说，样品的纯净度没有苛刻的要求，结合两种方法的回收率和精密度，对比两种方法的操作过程得出结果，方法二较方法一步骤简单，且方法二用时较短。故在本实验中选用方法二比较好。
2.4 样品中杂环胺的含量
试验中第一份卤汤a比第二份卤汤b多循环次数差不多60次。根据上面的方法，检测两份卤汤中杂环胺的含量。
表4 卤汤中杂环胺的含量测定
Tab. 4 Content of HAAs in Halogen soup samples ng·g-1
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IQ |
MeIQx |
4,8-DiMeIQx |
Harman |
Norharman |
AαC |
|
|
卤汤a |
— |
1.825ng/g |
0.797 ng/g |
— |
— |
— |
|
卤汤b |
0.092ng/g* |
5.453ng/g |
0.670 ng/g |
0.895ng/g |
0.096ng/g* |
— |
表5 卤汤中杂环胺的含量测定
Tab. 5 Content of HAAs in Halogen soup samples ng·g-1
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Trp-p-1 |
PhIP |
Trp-p-2 |
MeAαC |
总含量total |
|
|
卤汤a |
— |
4.361ng/g |
1.095ng/g |
— |
8.078ng/g |
|
卤汤b |
— |
9.937 ng/g |
0.464 ng/g* |
— |
17.607ng/g |
注：* .高于检出限而低于定量限
由表中可以看出MeIQx和PhIP的含量在卤汤中最多，且由于卤煮次数的增加(卤汤b比卤汤a多循环了60次)，卤汤中的杂环胺含量显著增加，含量由原来的8.078ng/g增至17.607ng/g。
3 总结
本试验设计并优化了前处理的提取体积和洗脱体积，并使用了超高效液相色谱-串联质谱来确保检测酱卤制品中杂环胺含量的准确性。得出了方法一中，杂环胺的最适提取体积为100ml，洗脱体积比在甲醇：氨水为(95:5;v:v)时提取的效果最佳。方法二中最适的提取体积为20ml;洗脱体积比在甲醇：氨水为(95:5;v:v)时提取的效果最佳。分别对两种方法的回收率和精密度进行检验，得出了的回收率几乎都在50%以上，精密度在1.37~7.64，且方法一二差别不显著，但方法一较为简单。检测了样品中的杂环胺的含量，得出卤汤中PhIP和MeIQx的含量最高，并且随着卤煮次数的增多，杂环胺的含量显著提高。本试验可以为以后检测酱卤肉制品中杂环胺提供一个参考。
尽管酱卤肉制品中杂环胺的含量检测量比较低，但是长远看来，还是需要特别的措施来减少酱卤制品中杂环胺的生成。法律和立法需要尽快规范酱卤肉制品中杂环胺的含量，为以后HACCP体系的关键控制点做铺垫。
